创新的Cytek® Amnis® ImageStream®X Mk II 成像流式细胞仪将流式细胞仪的高检测速度、高灵敏度以及表型分析能力与显微镜的高分辨图像及功能性研究完美结合。这种独特的组合方式可以实现单独使用两种技术都不能实现的广泛应用。
ImageStreamX Mk II 系统是台式多色成像流式细胞仪，可快速获取大量细胞，并采集多达12个通道的细胞图像。仪器获取大量的数码图像，进行光谱补偿并为您样本中的每个细胞都提供高质量的图像。我们的图像分析软件对每一个细胞都会采集上千个参数，这些参数中不仅包括荧光强度还有荧光的空间位置，结合此先进的软件，ImageStreamX 系统提供了无与伦比的细胞信息。
成像流式的广泛应用
ImageStreamX 系统的高分辨率的图像以及高通量，再结合逐个像素的光谱补偿以及上千个定量特征性参数，使ImageStreamX 系统成为强大的可开展广泛应用的成像流式细胞仪。ImageStreamX 系统可支持研究者开展一系列创新应用，例如：测量蛋白质共定位，核转位，点计数，细胞形变以及细胞互作等。灵活的系统配置使其成为有广泛应用需求的实验室的理想选择。独特的图像数据质量使其非常适合捕获关键信息，让科学研究真实而准确，并助力于高影响因子期刊的发表。
自动化工作流程和图像分析软件套装
ImageStreamX 系统的数据分析非常简单，点击“开始分析”并遵循IDEAS® 图像分析软件中任一核心应用的自动化工作流程即可。
在自定义分析上，软件中对每通道有86个特征性参数，有22个功能性的mask以及一个机器学习模块，该模块创建了一个创新算法来对您特定的细胞群进行分类。随后，” Feature Finder”向导可用来明确最能定义目的细胞群的特征性参数。
使用Amnis® AI软件选项，用户可访问最先进的软件分析工具，无缝整合ImageStreamX 的数据集，及使用卷积神经网络的深度学习。
这些强大的工具使图像分析变得简单，使样本的探索达到了一个全新的水平。
ImageStream®X Mk II光路设计
细胞以悬浮液的形式进行荧光标记，然后使用注射泵载入系统。样本被水动力聚焦在一条液流中，荧光被多根激光器所激发。明场、SSC以及荧光图像被一个20x，40x或60x的图像物镜组所捕获，并转移到滤光片组上，在滤光片组上每个颜色会被投影到空间分离的相机通道上。在空间配准中可收集到多达10种颜色的荧光，并测量每个探针的强度、细胞形态和相对于其他探针的位置。
时间延迟积分相机技术
Cytek® Amnis® ImageStream®X 流式细胞仪采用时间延迟积分（TDI）CCD技术。该模式捕获运动物体的图像，具有非常高的图像质量和卓越的光子灵敏度。在TDI模式中，每一行像素中的光电子向下传输，并与细胞的移动精确同步，从而增加光积分时间，其效果类似于随着物体平移相机。随后，每行像素在芯片底部读出，并利用图像分析软件工具对细胞图像进行重构以供研究。
高荧光灵敏度
ImageStreamX 的荧光灵敏度是用Spherotech的8峰彩虹校准微球来进行测量的。在三个通道中所有的8个峰都清晰可见，且等效荧光分子（molecules of equivalent fluorescence，MEF）≤2，在第一个峰和下一个最暗的峰之间的染色指数 (SI =(Mean2-Mean1)/(2xSD1)) 为92.2。高量子效率低噪音的相机可让 ImageStreammX 系统能以在12个通道下都极高的光子敏感度，来捕获每个颗粒的图片。这对于识别亚细胞器、微弱的表面信号或检测小颗粒至关重要。
多重放大倍数捕获全局
ImageStreamX 系统提供多个放大倍数，可以用于兼容广泛多样的细胞类型。分辨率为 1 µm/px 的20x物镜用于检测直径大于120 µm 的细胞，分辨率为0.5 µm/px的40 x物镜是兼顾速度和分辨率的理想选择，而分辨率为0.3 µm/px的60x物镜则可检测较小的原代细胞。高分辨率图像不仅能根据荧光强度，还能依据细胞形态对细胞群进行准确分类。图中显示的细胞是THP-1细胞在 ImageStreamX 系统上以各种放大倍数拍摄的图像。
基于形态学的检测表现
THP-1细胞中NF-kB的核转位或任何其他信号分子均可通过相似度参数Similarity的特征性功能来进行识别。ImageStreamX 系统的完全补偿的高图像质量可将NF-kB位于细胞质中的细胞（A）与 NF-kB 定位于细胞核中的细胞（B）较好地区分开来。
在稀有细胞类型中的内化和共定位
ImageStreamX 系统能快速收集稀有细胞类型的高分辨率图像，利用IDEAS®图像分析软件独特的基于图像的特征性参数来准确评估颗粒的内化和共定位。在本示例中，CpGB（红色）模拟病毒颗粒与pDCs（A）结合，并显示其如何内化（B）和共定位到细胞溶酶体（绿色）（C）。每个区域的代表性图像都被展示出来了。
小颗粒和细胞外囊泡（EV）检测
借助 ImageStreamX 系统的高光子灵敏度和高质量图像，可以跟踪 EVs 从产生到被周围水凝胶（A）捕获，再到自由循环颗粒（B），最后被细胞结合（C）和内化（D）的整个过程。
| 性能特征 | 40x 放大 | 60x 放大 | 20x 放大 |
|---|---|---|---|
| 数值孔径 | 0.75 | 0.9 | 0.5 |
| 像素大小 | 0.5 x 0.5 µm | 0.3 x 0.3 µm | 1.0 x 1.0 µm |
| 视野大小 | 60 x 128 µm | 40 x 170 µm | 120 x 256 µm |
| 成像速度 | 2,000 Obj/Sec | 1,200 Obj/Sec | 5,000 Obj/Sec |
样本特征
体积：20-200 ul
样品利用率：95%以上
物理参数
35" W x 26" H x 25" D (889 mm x 660 mm, 635 mm)
400 lbs. (182 kg)
自动化仪器操作
自动开关机
自动进样、获取数据、调补偿、批量分析
激光校正、调焦，校准以及系统自检
光学系统
激发系统：标配 488 nm; 选配 高功率 488 nm、375 nm、405 nm、 561 nm、592 nm 和 642 nm
侧向散射：标配785 nm
明场：在任何通道自定义选择
运行条件
450W, 100-240 V 交流电 , 50/60 Hz
对外部空气和水无特殊要求
12荧光通道
明场和SSC
荧光
| 相机1 | 相机2 | ||
|---|---|---|---|
| Ch 1: 435-480 nm | Ch 2: 480-560 nm | Ch 7: 435-505 nm | Ch 8: 505-570 nm |
| Ch 3: 560-595 nm | Ch 4: 595-642 nm | Ch 9: 570-595 nm | Ch 10: 595-642 nm |
| Ch 5: 642-745 nm | Ch 6: 745-785 nm | Ch 11: 642-745 nm | Ch 12: 745-785 nm |